Estimativa da viabilidade polínica de araçazeiro (Psidium cattleianum Sabine) através de distintos métodos de coloração / Estimation of pollen viability of strawberry guava (Psidium cattleianum Sabine) through distinct staining methods

RESUMO A análise histoquímica dos grãos de pólen através do uso de corantes permite a determinação de sua viabilidade polínica. O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência dos corantes orceína acética 2% e reativo de Alexander modificado, para estimar a viabilidade polínica de vinte acessos de araçazeiro (Psidium cattleianum Sabine) – uma árvore de frutos muito apreciados que também é utilizada para fins medicinais. Botões florais na pré-antese foram coletados e fixados em etanol:ácido acético (3:1) por 24 horas, após os botões foram transferidos para etanol 70% e mantidos sob refrigeração. A técnica de esmagamento das anteras foi utilizada no preparo das lâminas. Para cada acesso foram preparadas 2 lâminas por corante e analisados 500 grãos de pólen por lâmina. A viabilidade polínica foi estimada através da porcentagem de grãos de pólen viáveis. De modo geral, observou-se que os grãos de pólen corados com orceína acética 2% apresentaram viabilidade alta, acima de 98,1%, e os acessos não diferiram entre si. A viabilidade polínica através da coloração com a solução de Alexander variou de 43% (acesso Silveira Martins 1) a 97% (acesso Candelária 1), mostrando que provavelmente exista variabilidade genética entre os acessos. Em apenas dois acessos não houve diferença significativa entre os valores de viabilidade encontrados através dos dois corantes testados. Conclui-se então que a orceína acética 2% superestimou a viabilidade polínica de P. cattleianum e que o reativo de Alexander é o mais preciso, devido a sua dupla coloração (verde de malaquita + fucsina ácida). Assim, indica-se o reativo de Alexander para análise de estimativa da viabilidade polínica de genótipos de araçá envolvidos em um programa de melhoramento genético.

ABSTRACT The histochemical analysis of pollen grains through the use of stains makes it possible to determine their pollen viability. The purpose of this study was to compare the efficiency of 2% acetic orcein and Alexander’s stain modified, in estimating the pollen viability of twenty strawberry guava accessions (Psidium cattleianum Sabine) – a valued fruit tree which is used for medicinal purposes. Pre-anthesis flower buds were collected and fixed in ethanol:acetic acid (3:1 v/v) for 24 hours at room temperature, subsequently they were stored in 70% ethanol under refrigeration. The anther squash technique was performed for slide preparation. In each accession two slides per stain and 500 pollen grains were analyzed. The pollen viability was estimated according to the percentage of viable pollen grains. Overall, it was observed that pollen grains stained with 2% acetic orcein evinced a high viability, higher than 98,1%, and the accessions did not differ. The pollen viability estimated with Alexander’s stain varied from 43% (accession of Silveira Martins 1) to 97% (accession of Candelária 1), indicating that there is probably genetic variability among the accessions. There was no significant difference among the levels of viability found by means of the two stains in only two accessions. In conclusion, 2% acetic orcein overestimated the pollen viability of P. cattleianum, whereas the Alexander’s stain is in turn more accurate due to its two stains (green malachite and fuchsine). Thus, it is indicated Alexander’s stain for analysis estimation of pollen viability of strawberry guava genotypes involved in a genetic improvement program.

Chromovitrectomy: update

The basic concept for the application of vital dyes during vitreoretinal surgery is to assist in highlighting preretinal membranes and tissues which are very thin and semitransparent and thus difficult to detect. The vital dyes may be classified according to different criteria, where the most commonly applied includes chemical classification. In ophthalmic surgery, vital dyes are widely used in cataract and vitreoretinal surgery. The vital dyes, indocyanine green, infracyanine green, and brilliant blue stain the internal limiting membrane, and trypan blue and triamcinolone acetonide help to visualize epiretinal membranes and vitreous, respectively. This review exhibits the current literature regarding the properties of vital dyes, techniques of application, indications, and toxicities during vitreoretinal surgery and, also suggests that the field of chromovitrectomy represents an expanding area of research.

Grape stalks as substrate for white rot fungi, lignocellulolytic enzyme production and dye decolorization / Uso del escobajo como sustrato para el crecimiento de hongos de la pudrición blanca, la producción de enzimas ligninolíticas y la decoloración de tinturas

The aim of this work was to evaluate the potential of grape stalks, an agroindustrial waste, for growth and lignocellulolytic enzyme production via solid-state fermentation, using the following three white rot fungi: Trametes trogii, Stereum hirsutum and Coriolus antarcticus. The decolorization of several dyes by the above mentioned cultures was also investigated. Similar values of dry weight loss of the substrate were measured after 60 days (33-43 %). C. antarcticus produced the highest laccase and Mn-peroxldase activities (33.0 and 1.6 U/g dry solid). The maximum endoglucanase production was measured in S. hirsutum cultures (10.4 U/g), while the endoxylanase peak corresponded to T. trogii (14.6 U/g). The C. antarcticus/grape stalk system seems potentially competitive in bioremediation of textile processing effluents, attaining percentages of decolorization of 93, 86, 82, 82, 77, and 58 % for indigo carmine, malachite green, azure B, remazol brilliant blue R, crystal violet and xylidine, respectively, in 5 h.

El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial del escobajo, un residuo agroindustrial, como sustrato para el crecimiento y la producción de enzimas lignocelulósicas de tres hongos causantes de pudrición blanca en la madera: Trametes trogii, Stereum hirsutum y Coriolus antarcticus. Para ello se utilizaron técnicas de fermentación en estado sólido. También se ensayó la decoloración de colorantes industriales sobre estos cultivos. La pérdida de peso seco del sustrato fue similar después del día 60 (33-43 %). C. antarcticus produjo las mayores actividades de lacasa y Mn-peroxidasa (33,0 y 1,6 U/g peso seco). La mayor actividad endoglucanasa fue medida en cultivos de S. hirsutum (10,4 U/g), y la mayor actividad endoxilanasa en T. trogii (14,6 U/g). El sistema C. antarcticus/escobap mostró un importante potencial para su aplicación en la biorremediación de efluentes textiles, con porcentajes de decoloración de 93, 86, 82, 82, 77 y 58 % para índigo carmín, verde de malaquita, azure B, azul R brillante de remazol, cristal violeta y xilidina, respectivamente, en 5 h.

Corantes vitais em cromovitrectomia / Vital dyes in chromovitrectomy

O objetivo do artigo é apresentar os dados atuais da aplicação de corantes vitais durante cirurgia vitreorretiniana, "cromovitrectomia", bem como uma revisão da literatura atual sobre o assunto no tocante às técnicas de aplicação, indicações e complicações em cromovitrectomia. Um grande número de publicações tem abordado o perfil tóxico da indocianina verde na cromovitrectomia. Dados experimentais mostram uma toxicidade dose-dependente da mesma em várias populações de células retinianas. Novas gerações de corantes incluem: azul tripan, azul patente, acetato de triancinolona, infracianina verde, fluoresceína sódica, azul de bromofenol, acetato de fluorometolona e azul brilhante. Novos instrumentos podem permitir um corar seletivo de estruturas durante a vitrectomia. Este artigo mostra que o campo da cromovitrectomia está em plena expansão de pesquisas. Os corantes de primeira linha são a indocianina verde, infracianina verde e o azul brilhante. Azul patente, azul de bromofenol e azul tripan surgem como novos adjuvantes para melhor observação da membrana epirretiniana. Demais corantes que surgiram merecem maior investigação.

The aim of this article is to present the current data with regard to the application of vital dyes during vitreoretinal surgery, "chromovitrectomy", as well as to overview the current literature regarding the properties of dyes, techniques of application, indications and complications in chromovitrectomy. A large body of published research has recently addressed the toxicity profile of indocyanine green for chromovitrectomy. Experimental data demonstrate dose-dependent toxicity of indocyanine green to various retinal cells. Newer generation vital dyes for chromovitrectomy include trypan blue, patent blue, triamcinolone acetonide, infracyanine green, sodium fluorescein, bromophenol blue, fluorometholone acetate and brilliant blue. Novel instruments may enable a selective painting of preretinal tissues during chromovitrectomy. This review suggests that the field of chromovitrectomy represents an expanding area of research. The first line agents for internal limiting membrane staining in chromovitrectomy are indocyanine green, infracyanine green, and brilliant blue. Patent blue, bromophenol blue and trypan blue arose as outstanding biostains for visualization of epiretinal membranes. Novel dyes available for chromovitrectomy deserve further investigation.

Influence of calcium hydroxide on dyes for dentin labeling, anlyzed by means of a new methodology

Objetivou-se avaliar a influência do curativo intracanal de hidróxido de cálcio sobre a capacidade dos corantes azul de metileno e rhodamine B de marcar a dentina, quando incorporados à massa obturadora, no momento da espatulacão. Quarenta pré-molares inferiores humanos extraídos tiveram seus canais instrumentados sendo, então, divididos em quatro grupos. Em dois grupos, os canais foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio e propilenoglicol por 15 dias. Os outros, permaneceram em água destilada. Após a remocão do curativo, todos os canais foram obturados com condensacão lateral e cimento de óxido de zinco e eugenol acrescidos de azul de metileno ou rhodamine B. Assim, em dois grupos (com e sem curativo), os canais foram obturados com cimento contendo azul de metileno e os outros, rhodamine B. Decorridos 15 dias, as raízes foram seccionadas transversalmente nos tercos cervical, médio e apical, procedendo-se à análise da marcacão, com atribuicão de escores às características da mesma. O teste de Mann-Whitney acusou marcacão estatisticamente menor (p < 0,05) no grupo curativo/azul de metileno. Baseado nos resultados, concluiu-se que o curativo intracanal de hidróxido de cálcio interfere negativamente na capacidade marcadora do azul de metileno, diminuindo-a consideravelmente.